生物製藥工藝學-分離技術(ppt 21頁)

第四章 固相析出分離法
改變溶液條件，使溶質以固體形式從溶液中分出的操作技術稱為固相析出分離法。析出物為晶體時稱為結晶；析出物為無定形固體稱為沉澱法。固相析出法主要有鹽析法，有機溶劑沉澱法，等電點沉澱法，結晶法等。
鹽析法是利用各種生物分子在濃鹽溶液中溶解度的差異，通過向溶液中引入一定數量的中性鹽，使目的物或雜蛋白以沉澱析出，達到純化目的的方法。
鹽析的機製：高濃度的中性鹽溶液中存在著大量的帶電荷的鹽離子，它們能夠中和生物分子表麵的電荷，使之賴以穩定的雙電層受損，從而破壞分子外圍的水化層；另外，大量鹽離子自身的水合作用降低了自由水的濃度，從另一方麵摧毀了水化層，使生物分子相互聚集而沉澱。

有機溶劑沉澱法
向水溶液中加入一定量親水性的有機溶劑，降低溶質的溶解度，使其沉澱析出的分離純化方法。
主要機理：（1)親水性有機溶劑加入溶液後降低了介質的介電常數，使得溶質分子之間的靜電引力增加，聚集形成沉澱。
(2)水溶性有機溶劑本身的水合作用降低了自由水的濃度，壓縮了親水溶質分子表麵原有水化層的厚度，降低了它的親水性，導致脫水凝集。
等電點沉澱法
兩性電解質，在溶液pH處於等電點（pI）時分子表麵淨電荷為零，導致賴以穩定的雙電層及水化膜的削弱或破壞，分子間引力增加，溶解度降低。調節溶解的pH值，使兩性溶質溶解度下降，析出沉澱的操作。

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