熒光定量PCR檢測項目介紹(PPT 28頁)

熒光定量PCR檢測項目
HBV-DNA定量
乙肝基因分型
乙肝拉米夫定耐藥
HCV-RNA定量
病毒性腦炎
實時熒光定量PCR方法------TaqMan法
方法：TaqMan法
TaqMan---水解型雜交探針
實時熒光定量PCR定義
在PCR反應體係中加入熒光基團，
利用熒光信號累積實時監測整個PCR進程，
最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法
實時熒光定量PCR原理實時原理
常規PCR技術：
對PCR擴增反應的終點產物進行定量和定性分析
無法對起始模板準確定量，無法對擴增反應實時檢測
實時定量PCR技術：
利用熒光信號的變化實時檢測PCR擴增反應中每一個循環擴增產物量的變化，
通過Ct值和標準曲線的分析對起始模板進行定量分析
實時熒光定量PCR原理定量原理
如何對起始模板定量？
通過Ct值和標準曲線對起始模板進行定量分析
標本采集和運送
血液標本：用2ml真空采集管或1.5ml高壓滅菌離心管采集血液標本，
血標本采集後在2小時內送達實驗室（HCV采用EDTA抗凝的血漿）。離心
（檢驗單與標本一道）後用一次性吸管吸取血清或血漿加入經消毒的1.5ml的離心管中。
腦脊液：由臨床醫生采集後放入消毒的試管中及時送檢。
用於臨床標本采集的容器如試管或離心管，均應使用前高壓滅菌和密封
標本采集後，應盡可能快的送至實驗室，如運送時間需2小時以上，必須用冰盒送至實驗室。
..............................