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液相色譜培訓資料(PPT 69頁)

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企業培訓
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液相色譜, 培訓資料
液相色譜培訓資料(PPT 69頁)內容簡介
液相色譜按兩相極性不同分為:
正相色譜
反相色譜
化合物保留時間隨流動相配比的變化
不同極性的化合物出峰順序
流動相
流動相選擇注意事項:
純度:采用“HPLC”級溶劑
避免使用會引起柱效損失或保留特性變化的溶劑
對試樣有適宜的溶解度
溶劑粘度要小
與檢測器相匹配
流動相配製時的順序
HPLC用水可以通過以下幾個方麵來得到:
1專門的純水機或超純水機;
2去離子水重蒸;
3二次或三次重蒸水;
4采用類似家用的純水機;
5市場上瓶裝的純淨水或蒸餾水;
6其它途徑;
不管采用何種途徑,
配製流動相應用新鮮水,水質越高放置時間越短。
理想的HPLC用水應為18.2Ω的超純水,
並通過0.22um的濾膜,除去熱源、有機物、無機離子及空氣等。
溶劑前處理
過濾:0.45um或更小孔徑濾膜
目的:除去溶劑中的微小顆粒,
避免堵塞色譜柱,尤其是使用無機鹽配製的緩衝液。
脫氣
目的:除去流動相中溶解或因混合而產生的氣泡
一般混合溶劑中能容納的空氣量往往
要比單個溶劑所能容納的空氣總量要小
氣泡對測定的影響:
1)柱壓波動,流量偏小
2)基線波動
島津VP係列輸液泵
進樣器
自動進樣器
手動進樣器
原理:(六通閥)
注入方式:
1)全量注入
2)部分注入
HPLC六通閥進樣器的使用及保養
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液相色譜培訓資料(PPT 69頁)
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