酶工程之固定化酶(PPT 87頁)

第三章固定化酶
一.什麼是固定化酶？
二.固定化酶發展史
三.固定化酶的優點
四.固定化酶的缺點
第二節固定化酶的性質及其影響因素
1.固定化對酶反應體係的影響
2.固定化酶性質的變化
舉例：熱穩定性提高
最適pH的變化
對蛋白酶抗性提高
固定化酶Km的變化隨載體性質的變化
2.固定化後酶穩定性提高的原因
3.評價固定化酶的指標：
4.固定化酶活力測定方法—間歇測定
第三節固定化酶的製備
一．固定化方法簡介
一．固定化方法簡介—選擇依據
一．固定化方法簡介—品質檢測
二．酶的固定化方法
常用載體：
（二）結合法
離子鍵結合法：
酶蛋白上可供載體結合的功能基團：
常用載體及載體上常用的基團：
反應要求：
共價鍵結合法製備固定化酶的“通式”
載體活化方法：
A．重氮法
B．疊氮法
C．烷基化反應法
D．矽烷化法
E．溴化氰法
溴化氰亞氨碳酸基偶聯法
（三）交聯法
（三）交聯法常用試劑
（三）交聯法的形式
1.酶直接交聯法
2.酶輔助蛋白交聯
3.吸附交聯法
4.交聯包埋法
（四）包埋法
1．網格型包埋法
1．網格型包埋法常用載體
2．微囊型包埋法
①界麵沉澱法
②界麵聚合法
固定化酶方法研究熱點
各類固定化方法的特點比較
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