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分子生物學技術之DNA重組技術(ppt 35頁)

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生物科技
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分子生物學, dna重組, 重組技術
分子生物學技術之DNA重組技術(ppt 35頁)內容簡介
分子生物學技術之DNA重組技術內容提要:
現代分子生物學的快速發展,得益於上個世紀中葉以來研究方法、特別是基因操作和基因工程技術的進步。
基因操作主要包括DNA分子的切割與連接、雜交、電泳、細胞轉化、核酸序列分析以及基因人工合成、表達、定點突變和PCR擴增等,是分子生物學研究的核心技術。
基因工程是指在體外將核酸分子插入病毒、質粒或其它載體分子,構成遺傳物質的新組合,使之進入原先沒有這類分子的寄主細胞內並進行持續穩定的繁殖和表達。
基因工程技術是核酸操作技術的一部分,隻不過它強調了外源核酸分子在另一種不同的寄主細胞中的繁衍與性狀表達。
事實上,這種跨越物種屏障、把來自其它生物的基因置於新的寄主生物細胞之中的能力,是基因工程技術區別於其它技術的根本特征。
ColE1質粒載體:
鬆弛型複製控製的多拷貝質粒。
一般情況下,當培養基中氨基酸被耗盡,或是在細胞培養物中加入氯黴素以抑製蛋白質的合成,寄主染色體DNA的複製便被抑製,細胞的生長也隨之停止。
而鬆弛型質粒DNA卻繼續複製數小時,使每個寄主細胞中ColE1質粒的拷貝數達到1000~3000個,占細胞總DNA的50%左右。

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