基因工程的基本操作程序緒論(PPT 61頁)

1、目的基因概念：
主要指的是編碼蛋白質的結構基因。也可以是一些具有調控作用的因子。
2、目的基因獲取方法：
Ⅰ、從基因文庫中獲取目的基因
Ⅱ、利用PCR技術擴增目的基因
Ⅲ、化學方法直接人工合成
基因文庫的構建過程
將含有某種生物不同基因的許多DNA片斷,導入到受體菌的群體中,
各個受體菌分別含有這種生物的不同基因,稱為基因文庫。
PCR的全稱：
聚合酶鏈式反應
PCR的原理：
DNA複製
PCR技術擴增目的基因的前提條件：
要有一段已知的目的基因的核苷酸序列。
利用PCR技術擴增目的基因
啟動子的作用：
1、什麼是轉化？
2、目的基因導入植物細胞常用的方法是什麼？具體過程是怎樣的？
3、目的基因導入動物細胞常用的方法是什麼？基本操作程序是怎樣的？
4、目的基因導入大腸杆菌的方法是怎樣的？鈣離子有什麼作用？
1、導入目的基因後需要檢測哪些方麵？各采取什麼方法？
2、什麼是DNA分子探針？檢測時的DNA探針通過什麼原理來檢測目的基因和相應的mRNA？
3、利用抗體－抗原雜交檢測的原理是什麼？
歸納:基因工程的基本操作程序
獲取目的基因
從基因文庫
利用PCR
化學方法人工合成
構建基因表達載體
目的基因、啟動子、終止子、標記基因
將目的基因導入受體細胞
農杆菌轉化法、顯微注射法、Ca2+處理
目的基因的檢測與鑒定
檢測：是否插入、轉錄、翻譯
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