DNA重組克隆的單元操作課程(PPT 110頁)

第二節工具酶
一、限製性核酸內切酶（Restrictionendonuclease,RE）
（1）限製（Restriction）
（2）修飾（Modification）
（二）限製性內切酶的類型
1.I型限製性內切酶
（3）切割位點
2.II類限製性內切酶
（4）粘性末端
②3’端凸出（如PstI切點）
粘性末端的意義
②5’末端標記
（5）II型限製性核酸內切酶的切割方式
3.III類限製性內切酶
（三）限製性內切酶的命名
（四）影響限製性內切酶活性的因素
2.DNA的甲基化程度
3.溫度
4.緩衝液(Buffer)
使用的時候要特別注意！
（五）限製性內切酶對DNA的消化
2.完全消化
3.局部消化
4.限製酶酶切反應的終止
二、甲基化酶
三、DNA連接酶(DNAligase)
一、限製性核酸內切酶
三、DNA連接酶
四、基因工程中常用的DNA聚合酶：
1.大腸杆菌DNA聚合酶
2.Klenowfragment
3.T4噬菌體DNA聚合酶
4.T7噬菌體DNA聚合酶
5.耐熱DNA聚合酶
6.反轉錄酶
7.末端轉移酶
五、T4多核苷酸激酶
六、堿性磷酸酶
七、核酸酶
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