基因重組與基因工程技術課件(PPT 107頁)

重組DNA技術--基因重組與基因工程
DNA重組的基本模式
(分)------目的基因及載體的分離
化學合成法
從基因文庫中篩選
從mRNA反轉錄合成cDNA
聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction,PCR）
載體DNA的選擇
質粒載體的一般結構
切------限製性內切酶酶切
載體和目的基因的切斷
（二）人工接尾法：
（三）人工接頭連接法：
轉------重組體的轉化
宿主菌或受體細胞
感受態細胞（competent cell）
大腸杆菌感受態細胞的製備( 化學方法)
真核細胞的轉染
重組體克隆的篩選與鑒定
陽性重組子的篩選與鑒定
遺傳檢測法(根據重組載體的標誌作篩選)
限製性酶切法
PCR法
雜交篩選法
免疫學方 法
核苷酸序列測定法
遺傳檢測法
免疫化學檢測法
DNA序列分析法
真核細胞的篩選
外源基因在宿主細胞中的表達
原核生物基因結構和表達特點
影響外源基因在原核細胞中表達效率的因素：
真核基因結構及表達調控特點
..............................