臨床生化檢驗應用工程師基礎知識培訓(doc 33頁)

主要內容
一、生化基礎知識
二、生化儀器基礎知識
三、部分生化項目的臨床意義

內容摘要
一、 生化基礎知識
1.1生化診斷試劑盒為由一定的化學品或者酶類組成的多成分混合試劑（Reagent），最終以水溶液的方式與待測物發生一係列化學或者生化反應，通過生成物或反應物中某物質的吸光度變化，測量待檢測物中某種特定物質的含量。
1.2生化診斷試劑用於檢測樣本，包括：人體血清（主要）、血漿及尿液中的各種酶類和代謝產物，用於預測，診斷以及治療監測，協助臨床醫生診治疾病提供數據參考。
1.3按功能分為：肝功、血脂、腎功、心肌、代謝、免疫&風濕、離子&其他。
1.4試劑性能評價指標：
1 試劑外觀
2批間差
3準確度
4精密度
5線性（靈敏度）
6抗幹擾能力（特異性）
7穩定性
1.5試劑檢測原理（朗伯比爾定律）：A=Kbc
式中，A 為吸光度;K 為吸收係數，是與入射輻射的波長及吸收物質的性質有關的常數 ;b為液層厚度，單位為cm;c 為吸收物質的濃度。當濃度的單位為 mol/L時，K 的單位為L/mol?cm，稱為摩爾吸收係數，通常用ε 表示。摩爾吸收係數ε 表示物質對某一波長的輻射的吸收特性。ε愈大，表示物質對某波長輻射的吸收力愈強，因而分光光度法測定的靈敏度就愈高.
1.6理論值與實測值偏差的解釋：實測值偏離了朗伯比爾定律。
偏離 Lambert-Beer定律的因素：
1複合光對Beer 定律的偏離：吸收定律要求入射光為單色光，而分光光度計單色光的純度主要決定於色散元件及光路設計，即使高精度的儀器，也得不到純單色光，而是波長寬度的複合光，其結果導致偏離Lambert Beer 定律。
2 雜散光的影響：雜散光(stray light) 是進入檢測器待測波長以外的光。主要來源於儀器色散元件表麵的散射、單色器內壁塵埃等。
3狹縫寬度的影響：單色器設有進、出口狹縫，狹縫愈窄，單色光愈純，吸光度增加，但輻射能減小，對弱吸收帶的測量有一定影響。定性分析時，為提高分辨能力常采用較小的狹縫，而定量分析時，在靈敏度允許的情況下，宜采用較大狹縫。當出、入射狹縫寬度相等時，狹縫寬度引起的誤差最小。
4非吸收作用引起的誤差：
1.散射效應：光吸收定律隻適用於均勻的吸收體係，如待測溶液是混濁的，當光通過時，將產生散射效應。其結果使光通過吸收物質的光程不固定，散射光的一部分和透射光一起進入檢測器，導致偏離 Beer 定律。因此，免疫比濁法常用多點校準來做標準曲線。

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