膠體金生產工藝配方原則概述(PPT 80頁)

硝酸纖維膜生產工藝圖
孔徑定義的問題
孔徑對側向層析速度的影響
不同種類膜的IgG結合能力
不同種類膜的BSA結合能力
為什麼蛋白會結合到膜上?
結合力是什麼?
靜電
疏水力
這兩種結合力的效應是什麼?
使蛋白從溶液中分離出來
長久結合作用
靜電作用力
靜電作用力是正負電荷相互吸引產生的作用力
疏水作用力
疏水作用力又稱為疏水鍵。
它是由側鏈的疏水基團相互接近.而形成的一種作用力。
對維持分子的三、四級結構起著重要的作用。
每一個蛋白質都具有疏水基團和親水基團。
蛋白質疏水性狀和親水性狀
當蛋白質溶解在溶劑中時，蛋白質處於非常穩定的狀態，
此時蛋白質的親水基團展開在外，疏水基團收縮在內，
親水基團和水分子接觸，保證了溶解性的狀態；
當蛋白質沉澱出來時，疏水基團展開，親水基團收縮，
此時為疏水狀態，也呈現不穩定的固體狀態，
疏水基團和其他固體物的疏水基團通過疏水作用力結合，
達到固定的目的。
蛋白結合到固相材料上
蛋白結合到固相材料上是一個多步驟過程
取決於
蛋白溶液擴散到固相表麵
蛋白從溶液中分離出來
蛋白吸附到固相上
蛋白重排到最低能態
吸附過程
多位點結合
影響蛋白結合的因素
蛋白緩衝液
使用的膜
蛋白自身
應用體係
沒有通用的緩衝液，不同的係統必須分別優化。
作用：提供適合的PH,改善親水性,增溶性,提高穩定性
定律:
“蛋白在緩衝液中越不穩定，蛋白結合力越強”
緩衝液的優化
離子強度
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